H2S含量測(cè)定試劑盒

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義：

H2S是一種新型氣態(tài)信號(hào)分子，存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)，生理濃度的H2S對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用，并對(duì)自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

測(cè)定原理：

H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對(duì)苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán)，亞甲基藍(lán)在665nm處有最大吸收峰，通過測(cè)定其吸光值可計(jì)算H2S含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制：

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體16mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體8mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑四：液體8mL×1瓶，4℃保存。

試劑五：液體1.5mL×1管，4℃避光保存。

樣品處理：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血清（漿）：直接測(cè)定。

操作表：

1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至665nm。

2. 操作表

H2S含量計(jì)算公式：

用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y = 0.0022x，R2 = 0.9988

（1）組織樣品

a.按照蛋白濃度計(jì)算

H2S（nmol/mg prot）=×V反總÷(V樣×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr

b.按照樣本重量計(jì)算

H2S（nmol/g 鮮重）=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 681.8×ΔA÷W

(3) 細(xì)胞

H2S（nmol/104 cell）=×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))）=681.8×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）

（2）液體樣品H2S（nmol/mL）=×V反總÷V樣= 681.8×ΔA

V反總：反應(yīng)總體積，0.225mL；V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.15mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/mL

注意事項(xiàng)

*低檢出限為1nmol/mL。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

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H2S含量測(cè)定試劑盒

• 中文名稱：甲泛葡胺

• 英文名稱：Metrizamide

分子式：C18H22I3N3O8

分子量：789.1

• CAS號(hào)：31112-62-6

  級(jí)別：Reagent Grade

• EINECS編號(hào)：250-475-5

• 儲(chǔ)存條件：2～8℃

• 中文別名：甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影

• 英文別名：2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco

• 是否危險(xiǎn)：否

• 
  

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甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/阿米派克/造影胺/Metrizamide