我們知道化合物可以是酸性、堿性和中性的。查看 pKa 和官能團(tuán)可以幫助我們進(jìn)一步選擇正確的 SPE 吸附劑，并更好地了解它如何與我們感興趣的分析物配合使用。我們來(lái)看看復(fù)合多巴胺：

圖 1.多巴胺的結(jié)構(gòu)。

當(dāng)我們觀察結(jié)構(gòu)時(shí)，我們可以看到通過(guò)苯環(huán)的共軛。這種結(jié)合將增加我們的疏水鍵合?，F(xiàn)在讓我們看看官能團(tuán)的 pKa。

圖 2.每次 Chemicalize 添加多巴胺 pKa。

在圖 2 中，我們可以看到酸性醇官能團(tuán)的 pKa 為 9.80，胺堿性官能團(tuán)的 pKa 為9.13。記住一般化學(xué)的一些基礎(chǔ)知識(shí)，我們知道強(qiáng)酸和強(qiáng)堿在幾乎整個(gè)可用的 pH 范圍內(nèi)都會(huì)被電離。對(duì)于弱酸和弱堿來(lái)說(shuō)，情況正好相反。弱酸和弱堿的電離可以通過(guò)控制 pH 值來(lái)控制（有效地打開(kāi)或關(guān)閉）。那么什么是強(qiáng)與弱呢？讓我們看一下EVOLUTE® Express 用戶指南中的吸附劑化學(xué)選擇指南。

圖 3。查看分析物功能列，我們可以看到每個(gè)類別的 pKa 范圍，我們將使用它來(lái)幫助我們確定用于分析的最佳吸附劑化學(xué)性質(zhì)。

酸性官能團(tuán)的 pKa 值低于弱酸性分析物官能團(tuán)的 9.80 和 13.02。所以我們知道這些不是我們可以利用的東西。堿性官能團(tuán) pKa 為 9.13，這屬于我們的“弱堿性"類別。這意味著它在中性或酸性 pH 環(huán)境中將保持正電荷。有關(guān) pH 調(diào)節(jié)的快速回顧，請(qǐng)參閱pH 調(diào)節(jié)樣品制備博客。由于我們有一個(gè)弱堿性官能團(tuán)，我們將通過(guò)使用 EVOLUTE®CX 吸附劑來(lái)利用離子交換潛力。

圖 4. EVOLUTE Express CX 吸附劑，請(qǐng)注意改性聚苯乙烯二乙烯基苯聚合物，它使吸附劑具有水潤(rùn)濕性。

CX 吸附劑具有非極性（疏水性）和強(qiáng)陽(yáng)離子交換功能。有一個(gè)帶負(fù)電的磺酸官能團(tuán)，可保留帶正電的分析物。我們可以在圖 4 中看到疏水性和離子相互作用。酸性官能團(tuán)的 pK a約為 -7，這告訴我們它將在整個(gè)pH 范圍內(nèi) 100% 電離。我們還可以看到結(jié)構(gòu)的反相相互作用部分，該部分將允許疏水 相互作用。

圖 5. 在這里，我們可以看到裝載過(guò)程中 CX 吸附劑和帶電多巴胺分子之間發(fā)生疏水相互作用的位置。我們還看到同時(shí)發(fā)生的離子相互作用，從而產(chǎn)生混合模式相互作用。

現(xiàn)在讓我們看看 CX 吸附劑中的每個(gè)步驟是如何發(fā)生的，如《濫用藥物尿液檢測(cè)的現(xiàn)行方法》中所示。

在此示例中，我們使用人血清，并將使用EVOLUTE®EXPRESS CX 30 mg 96 孔板部件號(hào)：601-0030-PX01。

CX 樣品制備的典型過(guò)程基于目標(biāo)分析物的反相/疏水相互作用和離子交換能力。在圖 4 中，我們提到了聚合物吸附劑的額外優(yōu)勢(shì)。為什么這很重要？在傳統(tǒng)的硅膠基 SPE 中，您必須調(diào)節(jié)和平衡疏水性的吸附劑和篩板。對(duì)于這種聚合物 SPE 產(chǎn)品，吸附劑和篩板都是水可潤(rùn)濕的，并且對(duì)于水性樣品，吸附劑能夠與樣品相互作用，而無(wú)需調(diào)節(jié)和平衡。這還有一個(gè)好處是可以消除分析過(guò)程中孔干燥的可變性。如果您使用 96 孔板并且 A1 孔可能在 H12 之前幾分鐘被溶劑化，這尤其有用；EVOLUTE Express 系列的水潤(rùn)濕能力可最大限度地降低孔干燥和應(yīng)用結(jié)果中孔與孔之間差異的風(fēng)險(xiǎn)。