很多時(shí)候，進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染的研究人員必須進(jìn)行謹(jǐn)慎的平衡。實(shí)現(xiàn)足夠高的轉(zhuǎn)染水平以提供可靠的結(jié)果，同時(shí)又不在此過(guò)程中殺死太多細(xì)胞，是一項(xiàng)持續(xù)的斗爭(zhēng)。對(duì)于從事干細(xì)胞研究的科學(xué)家來(lái)說(shuō)，這些問(wèn)題更具挑戰(zhàn)性，因?yàn)樗鼈兊霓D(zhuǎn)染率歷來(lái)較低（通常低于5%）。 

許多科學(xué)家現(xiàn)在正在尋求利用干細(xì)胞進(jìn)行基于CRISPR的基因編輯，以在細(xì)胞水平上對(duì)疾病產(chǎn)生新的理解。有一種高效可靠的方法來(lái)轉(zhuǎn)染干細(xì)胞，以實(shí)現(xiàn)基因組編輯的新發(fā)現(xiàn)，這一點(diǎn)從未如此重要。現(xiàn)在非常需要針對(duì)CRISPR應(yīng)用優(yōu)化干細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案。允許干細(xì)胞維持其多能狀態(tài)并最大限度地減少轉(zhuǎn)染的細(xì)胞毒性的方案至關(guān)重要。

我們的支鏈兩親性肽膠囊（BAPC™）克服了脂質(zhì)體載體的問(wèn)題，有助于最大限度地減少轉(zhuǎn)染干細(xì)胞的壓力。這與誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）尤其相關(guān)，它們對(duì)環(huán)境變化非常敏感，對(duì)壓力反應(yīng)不佳。

將熒光激活細(xì)胞分選 (FACS) 分選的干細(xì)胞（輻射敏感細(xì)胞）培養(yǎng) 6 小時(shí)，并與 BAPC 和 Atto 633 一起孵育過(guò)夜。然后用固定在 4% FFA 中的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次。 DMSO 處理的細(xì)胞用作陰性對(duì)照。在上圖中，比例尺代表 10 微米，白色箭頭代表 BAPC 陽(yáng)性細(xì)胞。

Phoreus™ BAPtofect™-25 細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒最大限度地減少了干細(xì)胞轉(zhuǎn)染的壓力。由于 BAPC 是由合成的、天然存在的肽構(gòu)成的，它們是自組裝的、水溶性的、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒，并且不會(huì)觸發(fā)免疫系統(tǒng)反應(yīng)。

Phoreus目前正在與行業(yè)合作伙伴合作開(kāi)發(fā)iPSC干細(xì)胞轉(zhuǎn)染的新方案。 雖然這項(xiàng)初步工作已經(jīng)成功地證明了干細(xì)胞對(duì)染色BAPC的有效吸收，但目前正在進(jìn)行研究，以證明核酸的保護(hù)遞送導(dǎo)致干細(xì)胞成功轉(zhuǎn)化。這些新協(xié)議將促進(jìn)CRISPR Cas-9的遞送，并指導(dǎo)RNA用于干細(xì)胞中的基因編輯，從而在細(xì)胞水平上對(duì)疾病產(chǎn)生令人興奮的新理解。